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      1. 豬惡性水腫確診方法

        更新時間:2022-03-15 17:00:52作者:佚名

        豬惡性水腫確診方法

         ?。ㄒ唬┘?xì)菌學(xué)檢查

          1.病料采納生前可于部分穿刺采納水腫液。身后除采納部分水腫液及壞死安排外,還要采納肝、脾、腎、肺及汗水,尤以肺臟含菌較多。

          2.涂片、鏡檢將水腫液、汗水、臟器等制作涂片,肝臟外表作觸片,天然枯燥、火焰固定后,用革蘭染色法染色鏡檢。

          本菌是在肝外表及漿膜觸片染色標(biāo)本中,菌體構(gòu)成微曲折的長絲狀,這一形態(tài)特征在確診上具有很重要的意義。芽孢較菌體大,呈卵圓形,坐落菌體中心或近端。能運動,無莢膜,革蘭染色陽性。

          3.細(xì)菌別離培育 采納部分水腫液或尸身的肝臟安排,放于肝片肉湯中,置37℃恒溫箱中培育,24h肝片肉湯出現(xiàn)混濁,有沉積。經(jīng)3-4d后,取沉積物0.1 - 0.5mL,接于肝片肉湯中,于80℃溫水中30min后取出,冷卻后置于37℃溫箱中培育,待充沛發(fā)育后使用一般瓊脂斜面培育,經(jīng)證實無需氧菌稠濁時,使用血液葡萄糖瓊脂平板進行厭氧別離培育,當(dāng)見有呈彎曲長絲狀、柔嫩花邊樣菌落,并有溶血環(huán)時,能夠開始認(rèn)為是糜爛梭菌。

          4.動物感染實驗 取部分水腫液或尸身肝臟安排制成5-10倍懸液,或用肝片肉湯培育物0.1-0.2mL,接種于豚鼠股部肌肉,18-24h豚鼠逝世,打針部位發(fā)作嚴(yán)峻出血性水腫,肌肉濕潤,呈鮮紅色,部分水腫液涂片鏡檢,發(fā)現(xiàn)有兩端鈍圓的大桿菌。肝外表觸片鏡檢,見有長絲狀大桿菌時,即可確診。

          5.熒光抗體染色法(直接法) 取肝臟外表觸片數(shù)張,先用丙酮固定10min,再經(jīng)磷酸鹽緩沖液浸洗2 - 3min后,放人事先墊有浸濕濾紙,并在恒溫箱內(nèi)預(yù)熱至3 7℃的大培育皿中,再滴加糜爛梭菌的熒光抗體數(shù)滴于標(biāo)本片上,蓋上皿蓋,作用30min,取出,將標(biāo)本片先后在兩個盛有磷酸鹽緩沖液的小缸內(nèi)各浸洗5 - 7min,干后滴緩沖甘油(無水甘油9份,緩沖液1份)1滴,蓋上蓋玻片,于熒光顯微鏡下查看,如見有艷麗的黃綠色無關(guān)節(jié)長絲狀菌體,即可確診。

          取病料,然后接種于肉肝湯,在3 7 ℃厭氧培育24- 48h,純化后進行牛乳發(fā)酵實驗來鑒定產(chǎn)氣莢膜梭菌,牛乳培育基的“猛烈發(fā)酵”是產(chǎn)氣莢膜梭菌最杰出的生化特性,肉肝湯中5 - 6h即呈均勻污濁,并發(fā)生很多氣體,接種培育于牛乳培育基中8- 10h后,牛乳即被酸凝結(jié),同時發(fā)生很多氣體,使凝塊變成多孔的海綿狀,嚴(yán)峻時被沖成數(shù)段,乃至噴出管外。糜爛梭菌在牛乳中產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,緩慢凝結(jié)牛乳。

        本文標(biāo)簽: 惡性  水腫  確診  方法  細(xì)菌學(xué)  檢查  病料  采納  生前  

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