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2023-01-30
更新時(shí)間:2022-03-07 06:30:36作者:未知
優(yōu)點(diǎn):可用于所有食品的蛋白質(zhì)分析中;操作相對(duì)比較簡(jiǎn)單;實(shí)驗(yàn)費(fèi)用較低;結(jié)果準(zhǔn)確,是一種測(cè)定蛋白質(zhì)的經(jīng)典方法;用改進(jìn)方法可測(cè)定樣品中微量的蛋白質(zhì)。缺點(diǎn):最終測(cè)定的是總有機(jī)氮,而不只是蛋白質(zhì)氮;實(shí)驗(yàn)時(shí)間太長(zhǎng);精度差,精度低于雙縮脲法;所用試劑有腐蝕性。
注意事項(xiàng)
1、樣品應(yīng)是均勻的,如是固體樣品應(yīng)事先研細(xì),液體樣要混合均勻。
2、蒸餾時(shí),蒸汽發(fā)生要充足均勻,加入樣品后,應(yīng)用少量蒸餾水沖洗,以免影響結(jié)果偏低,加氧化鎂要快,防止氨損失。冷凝管口應(yīng)滲入吸收液中,防止氨損失。
3.蒸餾完畢后,應(yīng)先將接受瓶液面離開冷凝管下端,并放在其下方,冷凝液清洗管口內(nèi)壁,再蒸1min后關(guān)掉熱源,否則會(huì)造成吸收液倒吸。
凱氏定氮法是測(cè)定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無機(jī)銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收,再以標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定,就可計(jì)算出樣品中的氮量。
由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,可由其氮量計(jì)算蛋白質(zhì)含量,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。